Miten immunofluoresenssi tehdään?

Sisällysluettelo:

Miten immunofluoresenssi tehdään?
Miten immunofluoresenssi tehdään?

Video: Miten immunofluoresenssi tehdään?

Video: Miten immunofluoresenssi tehdään?
Video: Anna Kankaanpää Vuoden liikuntalääketieteellinen tutkimus 2020 -kilpailun finaalissa 2024, Marraskuu
Anonim

Seuraava on yleiskatsaus epäsuoran immunofluoresenssivärjäysprotokollan eri vaiheisiin

  1. Kokeilusuunnittelu ja näytteen valmistelu. …
  2. Näytekiinnitys. …
  3. Solujen läpäisy. …
  4. Estäminen. …
  5. Primäärinen vasta-aineinkubaatio. …
  6. Toissijaisen vasta-aineen inkubaatio. …
  7. Vastaväri ja asennus.

Miten suoritat immunofluoresenssin?

Kaikki inkubaatiovaiheet tapahtuvat huoneenlämmössä

  1. Pese kennot kahdesti ja aseta pinseteillä varovasti ylös käännetyt kennot peittävä lasi kostutettuun kammioon.
  2. Kiinnitä 4 % formaldehydillä 10 minuutiksi ja pese 3 ×.
  3. Läpäisevä 0,1 % TX-100/PBS:llä 15–20 minuutin ajan ja pese 3 ×.

Kuinka käytät immunofluoresenssia solussa?

Immunofluoresenssiprotokolla kiinnittyneille soluille

  1. Siemennä 1–1,5 x104 solua 4-kammioisen objektilasin kuoppaa kohti 500 ml:ssa viljelyalustaa. Inkuboi 37°C:ssa 5 % CO2.
  2. 32–36 tuntia solujen istutuksen jälkeen, poista soluviljelyalusta ja huuhtele solut 3 kertaa käyttämällä 500 µl 1X PBS:ää.

Mikä on esimerkki immunofluoresenssista?

Tutkija voi esimerkiksi luoda primäärisiä vasta-aineita vuoheen, jotka tunnistavat useita antigeenejä, ja sitten käyttää väriaineeseen kytkettyjä kanin sekundaarisia vasta-aineita, jotka tunnistavat vuohen vasta-aineen vakioalueen (" kanin anti-vuohi" vasta-aineet).

Mitä hyötyä immunofluoresenssivärjäyksestä on?

Immunofluoresenssivärjäys (IF) on laaj alti käytetty tekniikka biologisessa tutkimuksessa ja kliinisessä diagnostiikassa IF käyttää fluoresoivasti leimattuja vasta-aineita spesifisten kohdeantigeenien havaitsemiseen. Kuvaamisen jälkeen se on erittäin suora tekniikka, koska voit todella nähdä jotain.

Suositeltava: