Epäspesifisen vasta-ainesitoutumisen ja sen seurauksena taustasignaalin vähentämiseksi on suositeltavaa käyttää estoliuosta ennen inkubaatiota vasta-aineiden kanssa Tehokkain estoratkaisu olla se, joka sisältää seerumin samasta lajista, jossa sekundäärinen vasta-aine muodostui.
Miten estät taustatahroja?
Kudososien paksuuden vähentäminen voi auttaa vähentämään taustavärjäytymistä. Kokeile leikata ohuempia osia puhtaamman IHC:n saamiseksi. On myös tärkeää varoa, ettei osien kuivuminen pääse kuivumaan, sillä kuivuminen voi aiheuttaa voimakasta epäspesifistä värjäytymistä.
Kuinka optimoit immunofluoresenssin?
Immunofluoresenssimikroskopia: 10 teknistä vinkkiä menestykseen
- Solujen kiinnitys ja läpäisy. …
- Vasta-ainespesifisyys. …
- Käyttämällä sopivaa vasta-ainelaimennusta. …
- Puskurien ja estoaineiden optimointi. …
- Sopivan solutiheyden käyttäminen. …
- Useita värjäyksiä. …
- Toissijaiset vasta-aineet. …
- Taustan pienentäminen.
Mikä aiheuttaa taustavärjäytymistä?
Taustavärjäytyminen voi johtua epäasianmukaisesta vasta-aineen sitoutumisesta tai virheistä kudoslevyn valmistuksen aikana.
Vähentävätkö sekundaariset vasta-aineet taustasignaaleja?
F(ab)-spesifiset sekundaariset vasta-aineet voivat auttaa vähentämään taustasignaalia estämälläsekundaarisen vasta-aineen kudoksissa löytämien IgG-proteiinien epäspesifisen sitoutumisen.
