Logo fi.boatexistence.com

Miksi päteviä soluja on pidettävä jäällä?

Sisällysluettelo:

Miksi päteviä soluja on pidettävä jäällä?
Miksi päteviä soluja on pidettävä jäällä?

Video: Miksi päteviä soluja on pidettävä jäällä?

Video: Miksi päteviä soluja on pidettävä jäällä?
Video: OMATTOMAT PARADIGMAT - Uutiset ja chat - UFOt - Paranormaalit 2024, Saattaa
Anonim

Pidä ne kylmässä! Pätevien solujen valmistusprosessi on haastava, koska solujen on pysyttävä kylminä. Tämä on ratkaisevan tärkeää, koska solut ovat niin herkkiä ja hauraita, kun niistä tehdään päteviä Lämpötilan pitäminen alhaisena auttaa välttämään solukuoleman käsittelyn aikana.

Miksi reaktiot pidetään jäissä muunnoskokeen aikana?

Plasmidi-soluseos kuumennetaan sitten hetkeksi 45–50 °C:seen, jolloin DNA pääsee soluun rikkoutuneen kalvon läpi. Kuumennettu seos asetetaan sitten takaisin jäälle jotta plasmidit säilyvät bakteerien sisällä … Jos plasmidi-DNA-liuoksessa on liikaa suolaa, voi tapahtua kipinöintiä, mikä vaarantaa transformaation.

Miksi asetat putket jäälle?

Miksi luulet, että laitamme putket jäälle? Saadaksemme DNA:n bakteereihin, meidän täytyy pistää niihin reikiä kemiallisella kalsiumkloridilla (CaCl2). … Reiät, jotka on pistetty, jotta DNA pääsisi sisään, jättävät bakteerit vuotaviksi. Jos emme pidä niitä jäällä, he "vuotavat verta" kuoliaaksi.

Mikä on jääkylmän kalsiumkloridin rooli pätevien solujen valmistuksessa?

Kalsiumkloridin lämpöshokkimuunnosprosessi rohkaisee bakteerisoluja ottamaan DNA:ta ympäröivästä ympäristöstä. …Jääkylmä CaCl2-liuos helpottaa DNA:n sitoutumista solun pintaan, joka sitten pääsee soluun lyhyen lämpöshokin jälkeen (3).

Kuinka osaat solut säilyttää?

Pätevät solut tulee varastoida - 80 °C:ssa. Säilytys -20 °C:ssa heikentää merkittävästi muunnostehokkuutta (TE). Testattaessa NEB 5-alfa -kompetenttia E. colia (NEB C2987H), solut menettivät 94,5 % TE:stä vain 24 tunnin varastoinnin jälkeen -20 °C:ssa.

Suositeltava: