Sferoidit muodostettiin käyttämällä hyvin tunnettua ripustuspudotusmenetelmää Kerätyt solut suspendoitiin kasvatusalustaan konsentraationa 5 000 solua/20 µl. Valmistetun soluliuoksen pisarat (20 μl/tippa) kuvioitiin sitten 60 mm:n kudosviljelylevyn kannelle ja inkuboitiin 2 päivää pallojen muodostamiseksi.
Kuinka sferoidit luodaan?
Sferoideja voidaan kasvattaa muutamalla eri menetelmällä. Yksi yleinen menetelmä on käyttää matalan soluadheesion levyjä, tyypillisesti 96-kuoppaisia levyjä, sferoidiviljelmien massatuotantoon, joissa aggregaatit muodostuvat solulevyjen pyöristetylle pohjalle.
Mitä solusferoidit ovat?
Sferoidit, kolmiulotteiset (3D) soluviljelmät, jotka järjestäytyvät lisääntymisen aikana pallomaisiin muodostelmiin, saivat nimensä 1970-luvulla, kun tutkijat havaitsivat hamsterin keuhkojen suspensiossa kasvatetut solut asettuivat lähes täydelliseen pallomaiseen muotoon.
Miten mittaat sferoidit?
Analogisesti pallotilavuutta voidaan käyttää tehon mittana in vitro -syöpälääketutkimuksissa. Pallon tilavuus ( V=0,5pituusleveys2 ) määritetään suuren ja pienen aksiaalisen pituuden perusteella (tunnetaan yleisemmin pituutena ja leveytenä) sferoideista6, 7
Kuinka monta solua sferoidissa on?
Kuva. 10. Alun perin 5 × 104 soluista ja eri fraktiointimenetelmien mukaan säteilytettyjen sferoidien eloonjäämisen tietokonesimulaatio.