Amfolyyttejä käytetään pH-gradientin muodostamiseen kapillaarissa, ja erotettavat proteiinit kulkeutuvat (tai fokusoituvat) amfolyyttiväliaineen läpi, kunnes ne muuttuvat varautumattomiksi pI-arvossaan arvot.
Miksi amfolyyttejä käytetään IEF:ssä?
IEF:ssä amfolyytit liikkuvat varauksensa mukaan sähkökentän vaikutuksesta pH-gradientin läsnäollessa, kunnes molekyylin nettovaraus on nolla (esim. isoelektrinen piste, pI). … Jopa yksinkertaisimmat amfolyytit (esim. aminohapot) voivat luoda pH-gradientin ja toimia isoelektrisenä puskurina.
Miksi isoelektrinen piste on tärkeä?
Isoelektrinen piste on merkittävä proteiinien puhdistuksessa, koska se edustaa pH:ta, jossa liukoisuus on tyypillisesti minimaalinen. … Tällä polymeerillä on ainutlaatuiset ominaisuudet, jotka varmistavat, että proteiinit muodostavat pH-gradientin, kun kohdistat sähkökentän liuoksen poikki.
Kuinka amfolyytit luovat pH-gradientin?
CIEF:ssä heterogeeninen pH-gradientti luodaan kapillaarin sisään kohdistamalla jännite kantoaineamfolyyttien yli pH-gradientin leveys riippuu siitä, mikä amfolyyttien sarja valitaan. Amfolyytit ovat kaupallisesti saatavilla kattamaan sekä laajat että kapeat pH-alueet, kuten kuvassa 5.2.
Mitä on amfolyyttikemia?
Amfolyytit ovat yhdisteitä, jotka liuotettuina veteen (joka on itse amfoteerinen yhdiste) voivat toimia joko happona tai emäksenä.